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Guía práctica7 min de lectura

Cómo almacenar péptidos: temperatura, luz y los factores que determinan su estabilidad

Resumen

Qué condiciones mantienen estables tus péptidos, en polvo liofilizado o ya reconstituidos. Repasamos las temperaturas que conviene usar, qué ocurre con los ciclos de congelación, el daño de la luz UV y las prácticas que alargan la vida útil de cada muestra.

Principios generales de estabilidad peptídica

Un péptido es un polímero de aminoácidos, y su estabilidad pasa por conservar tres niveles estructurales: la estructura primaria (la secuencia), la secundaria (plegamiento local) y, en algunos casos, la terciaria (conformación 3D). La molécula se degrada por varias vías: hidrólisis de enlaces peptídicos, sobre todo en residuos Asp y Asn; oxidación de aminoácidos sensibles como Met, Cys, Trp, His y Tyr; desamidación de Asn y Gln; isomerización; racemización; y agregación. La rapidez con que ocurren estas reacciones la marcan la temperatura, el pH, la humedad, la presencia de oxígeno y la exposición a luz UV. Almacenar bien un péptido consiste, en esencia, en mantener esos factores al mínimo.

Péptidos liofilizados: condiciones óptimas

El polvo estéril liofilizado es la presentación más estable: sin agua, las reacciones de degradación se ralentizan de forma drástica. Para conservarlo bien conviene cuidar cuatro cosas. Temperatura: -20 °C si vas a guardarlo a largo plazo, hasta 24 meses; 2-8 °C para el mediano plazo, hasta 6 meses; y temperatura ambiente solo por periodos cortos, del orden de semanas. Humedad: mantén el vial cerrado herméticamente y, de ser posible, con desecante, porque la humedad residual acelera la hidrólisis. Luz: protégelo de la luz UV y del sol directo, idealmente en vial ámbar o dentro de una caja cerrada. Y vigila las fluctuaciones de temperatura: los cambios repetidos generan condensación y aceleran la degradación.

Péptidos reconstituidos: vida útil en fase acuosa

Reconstituir el péptido en agua bacteriostática reduce su vida útil de manera notable. Estas son las pautas. Temperatura: 2-8 °C, la refrigeración estándar; nunca a temperatura ambiente durante periodos prolongados. Tiempo: alrededor de 28-30 días con agua bacteriostática, y apenas 7-10 días con solución salina sin conservante. Luz: déjalo en su vial original o protégelo de la luz directa. Lo más importante, no congeles la solución reconstituida: los ciclos de congelación forman cristales de hielo que desnaturalizan el péptido. Si no vas a usarlo dentro de 30 días, lo sensato es guardarlo liofilizado y reconstituir únicamente la cantidad que necesites.

Efectos de la luz UV y de los ciclos de temperatura

La luz UV, ya sea sol directo o iluminación fluorescente intensa, oxida los aminoácidos aromáticos Trp y Tyr y los residuos de Met, y de ahí salen formas inactivas del péptido. El daño es mayor en solución acuosa que en polvo liofilizado, aunque incluso el polvo termina degradándose si la exposición se prolonga. Para los péptidos reconstituidos, lo más dañino son los ciclos repetidos de congelación-descongelación: cada ciclo suma agregación y resta actividad. Si necesitas repartir una solución ya reconstituida, divídela en alícuotas pequeñas, en tubos separados, y congela cada una una sola vez.

Señales de degradación

Revisa el péptido a simple vista antes de cada uso. Hay cuatro señales de alerta. Un cambio de color: polvo amarillento, o solución con un tinte amarillo o marrón en péptidos que deberían ser incoloros. Precipitados o partículas insolubles en la solución, que delatan agregación. Turbidez u opalescencia. Y olor anormal. Si aparece cualquiera de ellas, descarta el péptido sin usarlo. Y aunque un péptido guardado más allá de su vida útil recomendada no muestre señales visibles, da por hecho que ha perdido parte de su potencia: los resultados experimentales pueden salir inconsistentes.

Referencias
  1. Manning MC, Chou DK, Murphy BM, Payne RW, Katayama DS. "Stability of protein pharmaceuticals: an update." Pharm Res. 2010;27(4):544-575.
  2. Wang W, Singh S, Zeng DL, King K, Nema S. "Antibody structure, instability, and formulation." J Pharm Sci. 2007;96(1):1-26.
  3. Hawe A, et al. "Forced degradation of therapeutic proteins." J Pharm Sci. 2012;101(3):895-913.
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Equipo Peptidos Plus

Escribimos sobre péptidos de investigación, farmacología y control de calidad de laboratorio. Cada artículo lo redacta y revisa nuestro equipo; los datos que mencionamos van con su referencia.

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